光是一種電磁波,具有一定的波長(cháng)和頻率??梢?jiàn)光的波長(cháng)范圍在400~760nm,紫外光為200~400nm,紅外光為760~500000nm??梢?jiàn)光因波長(cháng)不同呈現不同顏色,這些波長(cháng)在一定范圍內呈現不同顏色的光稱(chēng)單色光。太陽(yáng)或鎢絲等發(fā)出的白光是復合光,是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長(cháng)順序排列的各種單色光,即紅、橙、黃、綠、青、藍、紫等,這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見(jiàn)光的能量而呈現不同顏色,而某些無(wú)色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長(cháng)的光可形成吸收光譜,由于物質(zhì)的分子結構不同,對光的吸收能力不同,因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜,而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比,分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
分光光度計就是利用分光光度法,通過(guò)測定被測物質(zhì)在特定波長(cháng)處或一定波長(cháng)范圍內光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類(lèi)的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(cháng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源。光源透過(guò)測試的樣品后,部分光源被吸收,通過(guò)測量樣品的吸光值,經(jīng)過(guò)計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計有哪幾種不同的分類(lèi)方式:
1.分光光度計按照波長(cháng)及應用領(lǐng)域的不同可以分為:(1)可見(jiàn)光分光光度計:測定波長(cháng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區;(2)紫外分光光度計:測定波長(cháng)范圍為200~400nm的紫外光區;(3)紅外分光光度計:測定波長(cháng)范圍為大于760nm的紅外光區;(4)熒光分光光度計:用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜;(5)原子吸收分光光度計:光源發(fā)出被測的特征光譜輻射,被經(jīng)過(guò)原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態(tài)原子所吸收,通過(guò)測定特征輻射被吸收的大小,來(lái)求出被測元素的含量。
2.分光光度計按自動(dòng)化程度分類(lèi):可分為手動(dòng)、半自動(dòng)、自動(dòng)分光光度計。
3.分光光度計按軟件可分為:帶掃描、不帶掃描。
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